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家禽類食物中殘留四環(huán)素類抗生素的快速液相色譜檢測

更新時間:2015-12-19        閱讀:3970

 目前,每年至少有50%的抗生素是用于畜牧業(yè)和水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)。四環(huán)素類藥物是臨床使用zui多,zui廣泛的一類抗生素,由于具有水溶性好,體內(nèi)代謝后大部分以原形排出以及在環(huán)境中不易發(fā)生生物降解等特點(diǎn),從而成為容易在水環(huán)境中儲存和積蓄的一類抗生素。這些抗生素作為環(huán)境外源性化學(xué)物對環(huán)境生物及生態(tài)產(chǎn)生深遠(yuǎn)的影響,并zui終可能對人類的健康和生存造成不利的影響。同時,由于該類藥物抗菌譜較廣,可以預(yù)測其所產(chǎn)生的生態(tài)毒理效應(yīng)是巨大的。因而,對四環(huán)素藥物類的檢測尤為必要。

       使用伍豐EX1700超快速液相色譜系統(tǒng)對市面銷售的雞肉中殘留的四環(huán)素進(jìn)行檢測,效果良好:對土霉素、四環(huán)素、金霉素的加樣回收率在80%以上。

一、實驗條件

1.實驗試劑

標(biāo)準(zhǔn)品四環(huán)素、土霉素、金霉素均購自德國EhrenstorferQuality公司;甲醇、乙腈(色譜純)購自德國Meker公司;一水檸檬酸(AR)、二水檸檬酸三鈉(AR)、三(CL)乙酸(AR)和二水合草酸(AR)均購自上海潤捷化學(xué)試劑有限公司;自制超純水。

2.  實驗條件

儀器:伍豐EX1700超快速液相色譜系統(tǒng)

色譜柱:UHPLC XB-C18 (1.8μm ,50 mm×4.6 mm i.d.)

柱溫:25℃

進(jìn)樣量:25 μl

流速:1.0 ml/min

流動相:乙腈:甲醇:0.03 M草酸=17:8:75

檢測波長:350 nm

3. 實驗樣品的前處理

3.1   樣品提取

用電子天平準(zhǔn)確稱取絞好的雞肉5 g,分別加入體積分?jǐn)?shù)20%的三CL乙酸溶液2 mL,pH=4的檸檬酸緩沖液20 mL,加入5 ug/mL混合標(biāo)樣100uL,機(jī)械混合10min,4 ℃、8000 r/min離心20 min,取上清液。

3.2樣品萃取

Strata C-18E (500mg,3ml)(購自美國Phenomenex公司),先加5 mL甲醇活化,后加5 mL超純水平衡,再取20 mL上清液上樣,接著用10 mL 5%甲醇溶液淋洗,zui后用10mL 0.01mol/L的草酸-甲醇溶液洗脫并收集,60 ℃氮?dú)獯蹈蔀橹梗?mL甲醇溶解,過0.45 μm濾膜,濾液供測定用。

二、實驗結(jié)果

1 雞肉中四環(huán)素類藥物檢測(添加水平0.1mg/kg)液相色譜圖

添加水平:0.1mg/kg

1—土霉素;2—四環(huán)素;3—金霉素

2   雞肉中四環(huán)素類藥物檢測(空白)液相色譜圖

雞肉空白

3 添加回收結(jié)果

三、 結(jié)論

    按照上述方法對雞肉中的土霉素、四環(huán)素及金霉素在伍豐EX1700上的超快速液相色譜分析檢測,加樣回收率在80%-90%之間,可以滿足雞肉中上述四環(huán)素的含量分析。

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