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怎么看液相色譜儀的技術指標是否優(yōu)異?

更新時間:2022-05-17        閱讀:2252
液相色譜儀的技術指標很多,有泵的、檢測器的、色譜柱等等。怎么看這些指標優(yōu)異與否?建議從以下幾個方面考慮:

1)噪音和漂移:在儀器穩(wěn)定之后,記錄基線1小時,基線帶寬為噪音,基線在1小時內(nèi)的變化為漂移。它們反映檢測器電子元件的穩(wěn)定性,及其受溫度和電源變化的影響,如果有流動相從色譜柱流入檢測器,那么它們還反映流速(泵的脈動)和溶劑(純度、含有氣泡、固定相流失)的影響。噪音和漂移都會影響測定的準確度,應盡量減小。

2)靈敏度:表示一定量的樣品物質(zhì)通過檢測器時所給出的信號大小。對濃度型檢測器,它表示單位濃度的樣品所產(chǎn)生的電信號的大小,單位為mV·ml/g。對質(zhì)量型檢測器,它表示在單位時間內(nèi)通過檢測器的單位質(zhì)量的樣品所產(chǎn)生的電信號的大小,單位為mV·s/g。

3)檢測限:檢測器靈敏度的高低,并不等于它檢測最小樣品量或最低樣品濃度能力的高低,因為在定義靈敏度時,沒有考慮噪聲的大小,而檢測限與噪聲的大小是直接有關的。

檢測限指恰好產(chǎn)生可辨別的信號(通常用2倍或3倍噪音表示)時進入檢測器的某組分的量(對濃度型檢測器指在流動相中的濃度——注意與分析方法檢測限的區(qū)別,單位g/ml或mg/ml;對質(zhì)量型檢測器指的是單位時間內(nèi)進入檢測器的量,單位g/s或mg/s)。又稱為敏感度(detectability)。D=2N/S,式中N為噪聲,S為靈敏度。通常是把一個已知量的標準溶液注入到檢測器中來測定其檢測限的大小。

檢測限是檢測器的一個主要性能指標,其數(shù)值越小,檢測器性能越好。值得注意的是,分析方法的檢測限除了與檢測器的噪聲和靈敏度有關外,還與色譜條件、色譜柱和泵的穩(wěn)定性及各種柱外因素引起的峰展寬有關。

4)線性范圍:指檢測器的響應信號與組分量成直線關系的范圍,即在固定靈敏度下,最大與最小進樣量(濃度型檢測器為組分在流動相中的濃度)之比。也可用響應信號的最大與最小的范圍表示。

定量分析的準確與否,關鍵在于檢測器所產(chǎn)生的信號是否與被測樣品的量始終呈一定的函數(shù)關系。輸出信號與樣品量最好呈線性關系,這樣進行定量測定時既準確又方便。但實際上沒有一臺檢測器能在任何范圍內(nèi)呈線性響應。通常A=BCx,B為響應因子,當x=1時,為線性響應。對大多數(shù)檢測器來說,x只在一定范圍內(nèi)才接近于1,實際上通常只要x=0.98~1.02就認為它是呈線性的。

線性范圍一般可通過實驗確定。我們希望檢測器的線性范圍盡可能大些,能同時測定主成分和痕量成分。此外還要求池體積小,受溫度和流速的影響小,能適合梯度洗脫檢測等。

5)池體積:除制備色譜外,大多數(shù)HPLC檢測器的池體積都小于10μl。在使用細管徑柱時,池體積應減少到1~2μl甚至更低,不然檢測系統(tǒng)帶來的峰擴張問題就會很嚴重。而且這時池體、檢測器與色譜柱的連接、接頭等都要精心設計,否則會嚴重影響柱效和靈敏度。



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