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HPLC中常用的檢測器種類有哪些

更新時間:2020-06-03        閱讀:19120
檢測器是用來連續(xù)監(jiān)測經(jīng)色譜柱分離后的流出物的組成和含量變化的裝置。作用是將柱流出物中樣品組成和含量的變化轉化為可供檢測的信號,常用檢測器有紫外吸收、熒光、示差折光、化學發(fā)光等。

1、紫外可見吸收檢測器(ultraviolet-visibledetector,UVD)

紫外可見吸收檢測器(UVD)是HPLC中應用較廣泛的檢測器之一,幾乎所有的液相色譜儀都配有這種檢測器。其特點是靈敏度較高,線性范圍寬,噪聲低,適用于梯度洗脫,對強吸收物質檢測限可達1ng,檢測后不破壞樣品,可用于制備,并能與任何檢測器串聯(lián)使用。紫外可見檢測器的工作原理與結構同一般分光光度計相似,實際上就是裝有流動池的紫外可見分光光度計。
 

2、熒光檢測器(fluorescence detector,F(xiàn)D)

是一種高靈敏度、有選擇性的檢測器,可檢測能產(chǎn)生熒光的化合物。某些不發(fā)熒光的物質可通過化學衍化生成熒光衍生物,再進行熒光檢測。其小檢測濃度可達0.1ng/ml,適用于痕量分析;一般情況下熒光檢測器的靈敏度比紫外檢測器約高2個數(shù)量級,但其線性范圍不如紫外檢測器寬。近年來,采用激光作為熒光檢測器的光源而產(chǎn)生的激光誘導熒光檢測器極大地增強了熒光檢測的信噪比,因而具有很高的靈敏度,在痕量和超痕量分析中得到廣泛應用。     
 

3、示差折光檢測器(differential refractive Index detector,RID)

示差折光檢測器是一種濃度型通用檢測器,對所有溶質都有響應,某些不能用選擇性檢測器檢測的組分,如高分子化合物、糖類、脂肪烷烴等,可用示差檢測器檢測。示差檢測器是基于連續(xù)測定樣品流路和參比流路之間折射率的變化來測定樣品含量的。光從一種介質進入另一種介質時,由于兩種物質的折射率不同就會產(chǎn)生折射。只要樣品組分與流動相的折光指數(shù)不同,就可被檢測,二者相差愈大,靈敏度愈高,在一定濃度范圍內(nèi)檢測器的輸出與溶質濃度成正比。
 

4、電化學檢測器(elec-chemical detector,ED)

 

電化學檢測器主要有安培、極譜、庫侖、電位、電導等檢測器,屬選擇性檢測器,可檢測具有電活性的化合物。目前它已在各種無機和有機陰陽離子、生物組織和體液的代謝物、食品添加劑、環(huán)境污染物、生化制品、農(nóng)藥及醫(yī)藥等的測定中獲得了廣泛的應用。其中,電導檢測器在離子色譜中應用較多。
 

5、化學發(fā)光檢測器(c iluminescence detector,CD)

化學發(fā)光檢測器是近年來發(fā)展起來的一種快速、靈敏的新型檢測器,其設備簡單,具有價廉、線性范圍寬等優(yōu)點。其原理是基于某些物質在常溫下進行化學反應,生成處于激發(fā)態(tài)勢反應中間體或反應產(chǎn)物,當它們從激發(fā)態(tài)返回基態(tài)時,就發(fā)射出光子。由于物質激發(fā)態(tài)的能量是來自化學反應,故叫作化學發(fā)光。當分離組分從色譜柱中洗脫出來后,立即與適當?shù)幕瘜W發(fā)光試劑混合,引起化學反應,導致發(fā)光物質產(chǎn)生輻射,其光強度與該物質的濃度成正比。

這種檢測器不需要光源,也不需要復雜的光學系統(tǒng),只要有恒流泵,將化學發(fā)光試劑以一定的流速泵入混合器中,使之與柱流出物迅速而又均勻地混合產(chǎn)生化學發(fā)光,通過光電倍增管將光信號變成電信號,就可進行檢測。

 

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